1. 底物識別與結合

• 糖基供體：尿苷二磷酸 - 半乳糖（UDP-Gal），酶的活性中心會識別 UDP-Gal 的 “UDP 基團" 和 “半乳糖基"，通過氫鍵、疏水作用固定供體分子；

• 糖基受體：糖蛋白 / 糖脂糖鏈末端的特定糖單元（主要是 β- 半乳糖或 β-N - 乙酰半乳糖胺，即 β-Gal 或 β-GalNAc），酶會精準識別受體糖單元的 C3 羥基（反應位點），確保后續連接的位置特異性。

2. 催化糖基轉移（核心反應）

1. 酶活性中心的親核氨基酸（如天冬氨酸）攻擊 UDP-Gal 的 “半乳糖基 C1"，斷裂 UDP 與半乳糖之間的磷酸酯鍵，同時與半乳糖基形成 “酶 - 半乳糖基中間體"（共價結合），釋放副產物 UDP；

2. 受體糖單元的 C3 羥基（親核位點）攻擊 “酶 - 半乳糖基中間體" 中的半乳糖基 C1，斷裂酶與半乳糖基的共價鍵；

3. 半乳糖基與受體糖單元的 C3 羥基形成α-1,3 糖苷鍵（立體構型由酶活性中心的空間結構決定，僅生成 α 型連接），最終形成產物 —— 帶有 α-Gal 表位的糖蛋白 / 糖脂（如 Galα1-3Galβ1-4GlcNAc-R）。

3. 產物釋放與酶再生

關鍵特征總結

• 特異性：僅催化 “UDP-Gal→受體糖 C3 羥基" 的 α-1,3 連接，不改變其他糖苷鍵，也不識別其他供體（如 UDP - 葡萄糖）或受體（如末端為葡萄糖的糖鏈）；

• 依賴性：需 Mg2?等二價金屬離子輔助（穩定 UDP-Gal 的磷酸基團，增強酶活性）；

• 定位性：作為膜結合酶，主要定位于高爾基體（細胞內糖基化的主要場所），確保在糖蛋白 / 糖脂的合成過程中實時修飾糖鏈。

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