Biotin-SS-Sulfo-NHS ester，cas：325143-98-4的介紹
2025-11-05
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Biotin-SS-Sulfo-NHS ester（生物素-二硫鍵-磺基 NHS 酯）是一種兼具水溶性、高反應(yīng)性和可切割特性的生物偶聯(lián)試劑，在生物化學(xué)、免疫學(xué)及生物醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用廣泛。
一、基本信息
中文名稱：生物素-二硫鍵-磺基 NHS 酯
英文名稱：Biotin-SS-Sulfo-NHS ester
CAS 號：325143-98-4
分子式：C??H??N?NaO?S?
分子量：606.67
外觀：通常為亮黃色或白色固體
結(jié)構(gòu)式：
二、化學(xué)結(jié)構(gòu)與特性
生物素（Biotin）：提供高親和力識別功能，可與親和素（Avidin）或鏈霉親和素（Streptavidin）形成穩(wěn)定非共價復(fù)合物。
二硫鍵（-SS-）：在還原條件下可斷裂，實現(xiàn)生物素標記與目標分子的解離。這一特性使得Biotin-SS-Sulfo-NHS ester在需要后續(xù)釋放生物素標記分子的場景中具有特殊優(yōu)勢。
磺酸基（-SO??）：顯著提升分子水溶性，使其可在純水溶液中反應(yīng)，無需添加有機溶劑（如DMF、DMSO），減少對生物分子（如蛋白質(zhì)、抗體）活性的破壞。
NHS 酯（N-羥基琥珀酰亞胺酯）：可與伯氨基（-NH?，如賴氨酸殘基）在中性pH（6.5-8.5）下快速反應(yīng)，生成穩(wěn)定的酰胺鍵，反應(yīng)效率高且副反應(yīng)少。
三、物理性質(zhì)與溶解性
溶解性：兼具有機溶劑溶解性和水溶性，可溶于DMF、DMSO等極性有機溶劑，也能直接溶于水（磺基修飾顯著提升水溶性）。
儲存條件：需密封保存在陰涼、干燥、通風(fēng)良好的庫房，取用前需確保干燥，避免頻繁解凍和冷凍，防止水解或變質(zhì)。一般推薦在-20℃以下冰凍保存。
四、功能與應(yīng)用
生物分子標記：
通過NHS酯與蛋白質(zhì)、抗體或其他含有伯胺的生物分子反應(yīng)，將生物素標記引入這些分子。
標記后的分子可以通過親和素或鏈霉親和素進行高特異性捕獲、固定或信號放大。
蛋白質(zhì)純化：
利用生物素與鏈霉親和素的高親和力，將標記的蛋白質(zhì)從復(fù)雜混合物中純化出來。
適用于細胞表面蛋白質(zhì)的標記和純化，以及核酸結(jié)合蛋白質(zhì)的純化。
可控釋放體系：
二硫鍵在還原條件下可斷裂，實現(xiàn)生物素標記分子的可控釋放。這一特性在藥物遞送、生物傳感器和蛋白質(zhì)組學(xué)等領(lǐng)域具有重要應(yīng)用。
例如，在蛋白質(zhì)組學(xué)研究中，可用于標記細胞裂解液中的蛋白質(zhì)，通過生物素-親和素系統(tǒng)富集目標蛋白后，加入還原劑（如DTT）切割二硫鍵，獲得無生物素標記的天然蛋白，用于質(zhì)譜鑒定或體外功能實驗。
生物偶聯(lián)與探針構(gòu)建：
用于構(gòu)建熒光探針、藥物偶聯(lián)物或功能材料，拓展在成像、診斷及治療中的應(yīng)用。
五、使用注意事項
反應(yīng)條件：偶聯(lián)反應(yīng)適宜在pH 7-9的緩沖液（如PBS、HEPES）中進行，反應(yīng)時間一般為1-2小時。
避免競爭反應(yīng)：避免使用含有伯胺的緩沖液（如Tris或甘氨酸），因為它們會與目標分子競爭與NHS酯的反應(yīng)。
切割條件：使用還原劑（如DTT、BME或TCEP）裂解二硫鍵時，應(yīng)優(yōu)化還原劑的濃度和反應(yīng)時間，以避免對目標分子造成損害。
儲存與處理：儲存時保持干燥和低溫，避免光照和氧氣接觸。取用前需確保干燥，避免頻繁解凍和冷凍。
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